L-elettroforeżi tal-ġel hija waħda mill-metodi ewlenin użati fil-bijoloġija molekulari għall-analiżi tad-DNA. Dan il-metodu jinvolvi l-migrazzjoni ta 'frammenti ta' DNA permezz ta 'ġel, fejn huma separati abbażi tad-daqs jew il-forma. Madankollu, qatt iltqajt ma' xi żbalji waqt l-esperimenti tal-elettroforeżi tiegħek, bħal strixxi mċappsa fuq il-ġel tal-agarose, jew l-ebda strixxa fuq il-ġel? X'tista' tkun il-kawża ta' dawn l-iżbalji?
It-tekniċi tagħna ġabru fil-qosor koppji ta 'soluzzjoni tal-problemi hawn għar-referenza tiegħek.
1. Faxex smeared fuq agarose gel
●Id-DNA ġie degradat. Evita l-kontaminazzjoni tan-nukleażi.
● Il-buffer tal-elettroforesi mhuwiex frisk. Wara l-użu ripetut tal-buffer tal-elettroforeżi, is-saħħa jonika tonqos, u l-valur tal-pH tagħha jiżdied, u għalhekk il-kapaċità tal-buffer tiddgħajjef, li taffettwa l-effett tal-elettroforeżi. Huwa rrakkomandat li l-buffer ta 'l-elettroforeżi jiġi sostitwit ta' spiss.
● Intużaw kundizzjonijiet ta 'elettroforeżi mhux xierqa. Tħallix il-vultaġġ jaqbeż l-20 V/ċm, u żomm temperatura <30 ° C waqt l-elettroforeżi. Għall-elettroforesi tal-linja tad-DNA ġgant, it-temperatura għandha tkun <15 ° C. Iċċekkja li l-buffer tal-elettroforesi għandu biżżejjed kapaċità ta 'buffer.
● Ġie mgħobbi wisq DNA fuq il-ġell. Naqqas l-ammont ta 'DNA.
● Wisq melħ fid-DNA. Uża l-preċipitazzjoni ta 'l-etanol biex tneħħi l-imluħ żejjed b'mod avvanzat.
● Id-DNA kien ikkontaminat bil-proteina. Uża estrazzjonijiet tal-fenol biex tneħħi l-proteina b'mod avvanzat.
● Id-DNA ġie żnaturat. Issaħħanx qabel l-elettroforeżi. Iddilwa d-DNA f'buffer b'20 mM NaCl.
2. Anomaliji Migrazzjoni tal-medda tad-DNA
● Rinaturazzjoni tas-sit COS tal-framment λHind III. Saħħan id-DNA għal 5 minuti taħt 65 ° C qabel l-elettroforeżi, u mbagħad kessaħ fuq unità tas-silġ għal 5 minuti.
● Intużaw kundizzjonijiet ta 'elettroforeżi mhux xierqa. Tħallix il-vultaġġ jaqbeż l-20 V/ċm, u żomm temperatura <30 ° C waqt l-elettroforeżi. Iċċekkja li l-buffer tal-elettroforeżi għandu biżżejjed kapaċità tal-buffer.
● Id-DNA ġie żnaturat. Issaħħanx qabel l-elettroforeżi. Iddilwa d-DNA f'buffer b'20 mM NaCl.
3. Faxex tad-DNA ħfief jew le fuq ġel agarose
● Kien hemm kwantità jew konċentrazzjoni insuffiċjenti ta 'DNA mgħobbija fuq il-ġel. Żid l-ammont ta 'DNA. L-elettroforesi tal-ġel tal-polyacrylamide hija kemmxejn aktar sensittiva mill-elettroforeżi tal-agarose, u t-tagħbija tal-kampjun tista 'titnaqqas b'mod xieraq.
● Id-DNA ġie degradat. Evita l-kontaminazzjoni tan-nukleażi.
● Id-DNA ġie elettroforizzat barra mill-ġell. Elettroforeża l-ġell għal inqas ħin, uża vultaġġ aktar baxx, jew uża ġel fil-mija ogħla.
● Sors tad-dawl W mhux xieraq intuża għall-viżwalizzazzjoni ta 'DNA mtebba' bil-bromur ta' etidju. Uża dawl W ta' tul ta' mewġ qasir (254 nm) għal sensittività akbar.
4. Meded tad-DNA nieqsa
●Id-DNA ta 'daqs żgħir ġie elettroforizzat barra mill-ġell. Elettroforeża l-ġell għal inqas ħin, uża vultaġġ aktar baxx, jew uża ġel fil-mija ogħla.
● Diffiċli biex tiddistingwi l-meded tad-DNA ta 'molekulari simili. Żid il-ħin tal-elettroforeżi, u ċċekkja l-konċentrazzjonital-ġell biex tiżgura bmod korrett fil-mija tal-ġel li jiġi utilizzat.
● Id-DNA ġie żnaturat. Issaħħanx qabel l-elettroforeżi. Iddilwa d-DNA f'buffer b'20 mM NaCl.
● Il-fergħat tad-DNA huma enormi, u l-elettroforeżi tal-ġell konvenzjonali mhix adattata. Analizza fuq elettroforesi tal-ġel tal-polz.Liema kwistjonijiet oħra kellek bl-elettroforesi tal-ġel tal-agarose? Se nirriċerkaw aktar għal gwidi fil-futur.
Beijing Liuyi biotechnology Co., Ltd (Liuyi Biotech) hija kumpanija speċjalizzata li tiffoka fuq prodotti relatati mal-elettroforesi fiċ-Ċina. L-istorja tagħha tibda fl-1970 meta ċ-Ċina kienet għadha ma daħlitx fir-riforma u ż-żmien tal-ftuħ. Permezz ta 'żvilupp ta' snin, Liuyi Bitotech għandha l-marka tagħha stess, li hija magħrufa bħala l-Marka Liuyi fis-suq domestiku għal prodotti ta 'elettroforeżi.
Il-marka Liuyi għandha aktar minn 50 sena storja fiċ-Ċina u l-kumpanija tista 'tipprovdi prodotti stabbli u ta' kwalità għolja madwar id-dinja kollha. Permezz ta 'żvilupp ta' snin, huwa denju tal-għażla tiegħek!
Iċ-ċelloli tal-elettroforeżi orizzontali (tankijiet/kmamar) ta 'Liuyi Biotech huma ta' kwalità għolja b'dehra tajba. B'daqsijiet differenti ta 'trejs tal-ġel, jistgħu jissodisfaw ir-rekwiżiti sperimentali differenti tiegħek. Għandna t-tim tekniku u l-fabbrika tagħna stess. Mid-disinn sal-manifattura, il-materja prima sal-partijiet ewlenin, nistgħu nikkontrollaw il-proċess kollu. Is-serje DYCP 31 hija għall-elettroforeżi tad-DNA, li huma mudellDYCP-31BN, DYCP-31CN,DYCP-31DN, uDYCP-31E. Id-differenzi bejniethom huma daqsijiet tal-ġel u prezz. Aħna nipprovdu daqsijiet sħaħ ta 'prodotti għall-klijenti tagħna. Il-mudellDYCP-32Cjista 'jagħmel l-akbar ġel 250mm * 250mm.
Sadanittant, nirrakkomandaw il-provvista ta 'enerġija elettroforesi tagħnaDYY-6C,DYY-6DuDYY-10Cgħaċ-ċelloli elettroforeżi tagħna (tankijiet/kmamar) DYCP-31 u 32 serje.
Jekk trid aktar informazzjoni dwar il-prodotti, jekk jogħġbok żur din il-websajt biex tikseb aktar, u merħba tikkuntattjana permezz ta 'email biex tgħarrafna dak li trid, u ara jekk nistgħux nipprovdu s-soluzzjonijiet għalik.
Għal aktar informazzjoni dwarna, jekk jogħġbok ikkuntattjana bl-email[email protetta], [email protetta].
Ħin tal-post: Mejju-09-2022