Preparazzjoni tal-kampjun uTagħbija
Minħabba l-użu ta 'sistema buffer kontinwa mingħajr ġel stivar f'ħafna każijiet, il-kampjuni għandu jkollhom konċentrazzjoni xierqa u volum żgħir. Uża apipettabiex iżżid bil-mod il-kampjun, b'5-10 μg kull bir, biex tevita tnaqqis sinifikanti fir-riżoluzzjoni. Metakampjun tat-tagħbija, il-provvista tal-enerġija għandha tintefa. Il-kampjun għandu jkun fih żebgħa indikatur (0.025% bromophenol blu jew oranġjo) u sukrożju (10-15%) jew gliċerol (5-10%) biex iżżid id-densità tiegħu, jikkonċentra l-kampjun, u jipprevjeni t-tixrid. Madankollu, xi kultant is-sukrożju jew il-gliċerol jistgħu jikkawżaw meded f'forma ta 'U fir-riżultati tal-elettroforeżi, li jistgħu jiġu evitati bl-użu ta' 2.5% Ficoll (polyvinylpyrrolidone).
Elettroforeżi
Il-vultaġġ għall-elettroforeżi huwa 5-15 V/ċm, ġeneralment madwar 10 V/ċm. Għas-separazzjoni ta 'molekuli kbar, il-vultaġġ għandu jkun aktar baxx, ġeneralment ma jaqbiżx il-5 V/ċm.
Tbajja
Żebgħa fluworexxenti ethidium bromide (EB) huwa komunement użat għat-tbajja biex josservaw il-meded tad-DNA fil-ġel agarose. EB jista 'jdaħħal bejn pari bażi ta' molekuli tad-DNA, li jikkawża EB biex jorbot mad-DNA. L-assorbiment tad-dawl ultravjola ta '260 nm mid-DNA huwa trasferit għal EB, u l-EB marbut jarmi fluworexxenza f'590 nm fir-reġjun aħmar-oranġjo tal-ispettru tad-dawl viżibbli. It-tbajja tal-ġel f'soluzzjoni ta '1 mmol/L MgSO4 għal siegħa tista' tnaqqas il-fluworexxenza fl-isfond ikkawżata minn EB mhux marbut, u tiffaċilita l-iskoperta ta 'ammonti żgħar ta' DNA.
Iż-żebgħa EB għandha bosta vantaġġi: hija faċli biex tużah, ma tkisserx l-aċidi nuklejċi, għandha sensittività għolja, u tista 'tebgħa kemm DNA kif ukoll RNA. EB jista 'jiġi miżjud mal-kampjun u ssegwi bl-użu ta' assorbiment UV fi kwalunkwe ħin. Wara t-tbajja ', EB jista' jitneħħa bl-estrazzjoni b'n-butanol.
Madankollu, iż-żebgħa EB hija mutaġena qawwija, u għandhom jittieħdu prekawzjonijiet, bħall-ilbies ta 'ingwanti tal-polyethylene, waqt l-immaniġġjar. Acridine oranġjo huwa wkoll żebgħa użata b'mod komuni minħabba li tista 'differenzja bejn aċidi nuklejċi b'linja waħda u b'linja doppja (DNA, RNA). Jesibixxi fluworexxenza ħadra (530 nm) għal aċidi nuklejċi b'linja doppja u fluworexxenza ħamra (640 nm) għal aċidi nuklejċi b'linja waħda. Barra minn hekk, żebgħa oħra bħal methylene blu, methylene aħdar, u quinoline B jistgħu jintużaw għat-tbajja '.
Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) speċjalizzat fil-manifattura ta 'strumenti ta' elettroforeżi għal aktar minn 50 sena mat-tim tekniku professjonali tagħna stess u ċ-ċentru ta 'R&D. Għandna linja ta 'produzzjoni affidabbli u kompluta mid-disinn sa spezzjoni, u maħżen, kif ukoll appoġġ għall-kummerċjalizzazzjoni. Il-prodotti ewlenin tagħna huma Electrophoresis Cell (tank/kamra), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System eċċ.
Issa qed infittxu msieħba, kemm it-tank tal-elettroforeżi OEM kif ukoll id-distributuri huma milqugħa.
Jekk għandek xi pjan ta 'xiri għall-prodotti tagħna, jekk jogħġbok ikkuntatjana. Tista' tibgħatilna messaġġ bl-email[email protetta]jew[email protetta], jew jekk jogħġbok ċempelna fuq +86 15810650221 jew żid Whatsapp +86 15810650221, jew Wechat: 15810650221.
Jekk jogħġbok Skennja l-kodiċi QR biex iżżid fuq Whatsapp jew WeChat.
Ħin tal-post: Diċ-20-2023