1. Klassifikazzjoni
L-elettroforesi tal-ġel hija maqsuma f'tipi vertikali (inklużi ġels tal-kolonna u ġellijiet ċangaturi) u tipi orizzontali (prinċipalment ġellijiet ċangaturi) (Figura 6-18). Ġeneralment, is-separazzjoni vertikali hija kemmxejn superjuri għall-orizzontali, iżda l-preparazzjoni tal-ġel orizzontali għandha mill-inqas erba 'vantaġġi: hemm appoġġ taħt il-ġell kollu, li jippermetti l-użu ta' agarose b'konċentrazzjoni baxxa; huwa possibbli li jiġu ppreparati pjanċi tal-ġel tal-agarose ta 'speċifikazzjonijiet differenti; il-preparazzjoni tal-ġel u t-tagħbija tal-kampjuni huma aktar konvenjenti; il-kamra tal-elettroforesi hija faċli biex tinbena u kost-effettiva. Peress li l-elettroforeżi orizzontali titwettaq bil-pjanċa tal-ġel tal-agarose mgħaddsa kompletament madwar 1mm taħt il-wiċċ tal-buffer tal-elettroforeżi, tissejjaħ ukoll elettroforeżi mgħaddsa.
Electrophoresis Tank DYCP-31DN għall-elettroforeżi tal-ġel tal-agarose
2.Sistema Buffer
Fis-separazzjoni tal-aċidu nuklejku, il-biċċa l-kbira tas-sistemi jadottaw sistemi kontinwi. Buffers tal-elettroforeżi użati b'mod komuni jinkludu buffer TBE (0.08mol/L Tris·HCl, pH 8.5, 0.08mol/L aċidu boriku, 0.0024mol/L EDTA) u THE (0.04mol/L Tris·HCl, pH 7.8, 0.02mol/L). aċetat tas-sodju, buffer 0.0018mol/L EDTA). Dawn il-buffers huma ġeneralment ippreparati bħala 10x soluzzjonijiet stokk u dilwiti għall-konċentrazzjoni meħtieġa meta jkunu qed jintużaw. Ir-rati ta' migrazzjoni tad-DNA lineari u ċirkolari fil-ġel tal-agarose ivarjaw skond il-buffer użat. Fil-buffer THE, ir-rata ta 'migrazzjoni ta' DNA lineari hija akbar minn dik ta 'DNA ċirkolari, filwaqt li fil-buffer TBE, l-oppost huwa minnu.
3.Preparazzjoni ta 'Agarose Gel
(1) Preparazzjoni ta 'Ġell Agarose Orizzontali
(a) Ipprepara l-konċentrazzjoni meħtieġa tal-ġel tal-agarose billi tuża buffer tal-elettroforeżi 1x.
(b) Saħħan l-agarose biex tlesti x-xoljiment jew f'banju ta' l-ilma jagħli, fuq stirrer manjetiku, jew f'microwave. Kessaħ is-soluzzjoni tal-agarose għal 55°C u żid żebgħa tal-bromur tal-etidju (EB) għal konċentrazzjoni finali ta’ 0.5 μg/ml.
(c) Issiġilla t-truf tal-ħġieġ jew pjanċi akriliċi b'ammont żgħir ta 'ġel tal-agarose, żid moxt, u poġġi s-snien tal-moxt madwar 0.5 ~ 1.0 mm 'il fuq mill-pjanċa.
(d) Ferra s-soluzzjoni tal-ġel tal-agarose imdewweb kontinwament fil-moffa tal-ħġieġ jew tal-pjanċa akrilika (il-ħxuna tiddependi fuq il-volum tal-kampjun tad-DNA), tevita l-introduzzjoni ta 'bżieżaq tal-arja. Ħalliha tissolidifika b'mod naturali f'temperatura tal-kamra.
(e) Neħħi b'attenzjoni l-moxt wara solidifikazzjoni sħiħa. Żid ammont xieraq ta 'buffer ta' l-elettroforeżi mat-tank tal-ġel, u tiżgura li l-pjanċa tal-ġell tkun mgħaddsa madwar 1 mm taħt il-wiċċ tal-buffer ta 'l-elettroforeżi.
(2) Preparazzjoni ta 'Ġell Agarose Vertikali
(a) Neħħi l-grass jew il-fdal mill-pjanċi tal-ħġieġ billi taħsel bl-etanol.
(b) Poġġi spacer plates bejn id-digi ta 'quddiem u ta' wara, allinja t-truf tal-spacer plates mad-digi ta 'quddiem u ta' wara, u waħħalhom bil-klampi.
(c) Żid 2% agarose f'1x buffer bejn it-truf tal-pjanċi spacer biex tifforma plug agarose għoli ta' 1 ċm fil-qiegħ tal-kamra tal-ikkastjar tal-ġel.
(d) Ferra l-ġell tal-agarose imdewweb fil-konċentrazzjoni mixtieqa, ippreparat f'1x buffer, fil-kamra tal-ġel sa 1 ċm taħt il-parti ta' fuq.
(e) Daħħal il-moxt, tevita li tinqabad il-bżieżaq tal-arja taħt is-snien tal-moxt. Xi drabi, it-tikmix jista 'jidher fis-snien tal-moxt waqt it-tkessiħ tal-ġel tal-agarose; f'każijiet bħal dawn, sempliċement żid ftit agarose imdewweb fil-parti ta 'fuq biex tissolidifikah.
(f) Neħħi l-moxt. Biex tevita t-tnixxija tal-buffer fl-islott tat-tagħbija, issiġilla l-konnessjoni bejn il-pjanċa tal-ġel tal-agarose u l-kamra tal-elettroforesi b'2% agarose u żid l-ammont meħtieġ ta 'buffer.
(g) Żid 1x electrophoresis buffer mal-kamra tal-ġel.
(h) B'attenzjoni tagħbija kampjuni tad-DNA fuq il-ġel tal-agarose taħt il-buffer.
Aktar informazzjoni dwar l-għarfien bażiku dwar l-elettroforesi tal-ġel tal-agarose, se naqsmu l-ġimgħa d-dieħla. Awgura li din l-informazzjoni tkun ta' għajnuna għall-esperiment tiegħek.
Beijing Liuyi Biotechnology Co Ltd (Liuyi Biotechnology) speċjalizzat fil-manifattura ta 'strumenti ta' elettroforeżi għal aktar minn 50 sena mat-tim tekniku professjonali tagħna stess u ċ-ċentru ta 'R&D. Għandna linja ta 'produzzjoni affidabbli u kompluta mid-disinn sa spezzjoni, u maħżen, kif ukoll appoġġ għall-kummerċjalizzazzjoni. Il-prodotti ewlenin tagħna huma Electrophoresis Cell (tank/kamra), Electrophoresis Power Supply, Blue LED Transilluminator, UV Transilluminator, Gel Image & Analysis System eċċ.
Issa qed infittxu msieħba, kemm it-tank tal-elettroforeżi OEM kif ukoll id-distributuri huma milqugħa.
Jekk għandek xi pjan ta 'xiri għall-prodotti tagħna, jekk jogħġbok ikkuntatjana. Tista' tibgħatilna messaġġ bl-email[email protetta]jew[email protetta], jew jekk jogħġbok ċempelna fuq +86 15810650221 jew żid Whatsapp +86 15810650221, jew Wechat: 15810650221.
Jekk jogħġbok Skennja l-kodiċi QR biex iżżid fuq Whatsapp jew WeChat.
Ħin tal-post: Diċ-07-2023